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金银花与忍冬的体外印迹等效性研究

* 来源: * 作者: * 发表时间: 2020-07-24 0:42:29 * 浏览: 5
摘要:目的利用超分子印迹模板规则研究忍冬与忍冬的体外印迹等效性,为解决忍冬与忍冬之间的纠纷提供新的解决方法。方法:以金银花渣,忍冬忍冬和菊花渣为主要分子,以金银花,忍冬忍冬,双黄连(金银花),双黄连忍冬,银翘山(金银花)和银翘散为主要分子。忍冬的水提取物是客体分子,选择性地吸附了3种主体分子和6种客体分子。通过HPLC测定吸附前后的客体分子水溶液的指纹。总量统计矩方法用于计算总量一阶矩及其差,并用t检验差。结果金银花和菊花的宿主分子组,金银花和菊花的宿主分子组以及金银花和菊花的宿主分子组吸附了六个客体分子后,总一阶矩差为经t检验,P1 = 0.94> 0.05,P2 = 0.02 <0.05,p3 =="" 0.04=""><0.05。在所有的客体分子被金和忍冬主体分子吸附之后,总的第一矩差没有显着差异。但是,被菊花的主要分子吸附后,与被金银花和忍冬的主要分子吸附后相比,存在显着差异。结论金银花和忍冬的印迹模板相似,但忍冬和忍冬的印迹模板存在差异。这表明金银花和忍冬之间有印记等效性,这也与临床用药一致。 “印迹等效”是指两者具有不同的化学结构并反映相同(相似)的“印迹模板”作用规律的现象。在临床上,它们是异质的,也就是说,不同的物质会产生相同的效果。金银花和忍冬在我国资源丰富,药用历史悠久。两者最初都属于金银花,并在2005年版中国药典中列出。至此,南北“两朵花”的争端开始展开。争端的出现似乎是根本原因,但实质是对中药异质等效法则的验证。金银花主要产于山东和河南等北部种植区,而忍冬则主要分布在湖南,四川和广东等南部种植区[1],二者的外观特征也有很大差异[2-3]。="" ]。此外,金银花和忍冬的成分组成和种类也不相同。根据现有文献统计,就化学成分而言,金银花比忍冬属植物含有更多的虹彩和类黄酮。金银花比金银花含有更多的三萜皂苷。各种化学成分的含量也存在显着差异[4-16]。忍冬中的绿原酸类化合物含量明显高于忍冬。木犀草素,芦丁,金银花和木犀草素-7-o-β-d-半乳糖苷的含量远高于忍冬。例如,山东平邑金银花中木犀草素的质量分数为0.0739%,湖南怀化的木犀草素中没有木犀草素,重庆秀山的绿原酸质量分数高达9.03%,为比山东高很多平邑金银花中绿原酸的含量为4.08%[17-18]。就微量元素而言,金银花中的铁(fe)和镍(ni)含量高于金银花,金银花中的锰(mn)含量高于金银花[19]。尽管金和菠萝中有效物质的地理分布,外观和形式,有效成分的类型和含量存在差异,但两者在性质,口味和经络,功能和适应症,甚至用法和剂量方面都保持一致。这是中医的临床实践。长-足月执业过程和药典可得到充分证实[20]。但是,为什么会出现这种现象,为什么两种不同类型和不同化学成分的中药在临床上能产生相同的治疗效果呢?不难看出,金银花和忍冬的药理作用不仅遵循传统的药理作用规律,而且还具有特殊的作用规律,即异质等效法则,即由药理作用产生的药理综合作用。中药的多重成分是各个成分的烙印。模板对人体的印迹效果的结果可以通过超分子印迹模板的理论来明确阐明。印迹模板的概念源自费歇尔酶和底物的键锁模型以及鲍林的抗体形成理论,该理论与经典药理学的受体-配体理论相似,可用于解释受体-配体理论。但是有一个区别。它是指使用特定的模板分子作为客体分子来发现和制备对客体分子具有特定选择性的宿主分子的过程。它属于超分子化学领域的客体化学研究类别,可以反映自组织和自组织。汇编,自我识别和自我复制的特征[21-27]。超分子印迹模板的概念是化学分子结构的概念。它是可以完全匹配空间结构和结合位点的模板。对于中药成分,它不仅是分子结构的空间活性结构,而且还是活性原子团。晶格的空间排列可以从化学物质的起源解释宿主和客体分子的一般作用规律(一定程度上是受体-配体理论)。例如,哌替啶,吗啡,美沙酮,喷他佐辛,芬太尼等可以与脑啡肽竞争作用于大脑中的阿片受体,并发挥相同的中枢镇痛作用。然而,这些止痛药中脑啡肽的结构距离脑啡肽的结构有一千英里[28]。这意味着可以通过不同的材料结构产生相同的药理作用。因此,单独的受体-配体和结构-配体理论不能用于深入分析。自然地,吗啡受体的三点组合只能抽象为印记。模板的空间结构表达。大量的生物超分子化学表明,动植物来源的中药是一个巨大的超分子系统,是根据印迹模板自然分子社会自主行动的结果[29]。因此,金银花和忍冬的异质等效现象只能由高于经典结构-活性关系的超分子印迹模板理论来解释:不同的物质可以在具有相同印迹模板的相同印迹模板上起作用。可通过体外印迹交叉实验验证。="" 1实验原理基于中医超分子理论。中药主体分子与客体分子分离的实质是从中药超分子系统中洗脱模板小分子以保留母体印迹模板的过程,包括中药的提取和溶解。医学成分。因此,可以通过充分提取和溶解金银花和忍冬的成分来实现超分子主体和客体分子的分离过程。在本实验中,分离金银花和忍冬的宿主和客体分子后,可以获得渣l(宿主分子)和忍冬的提取物(来宾分子)。由于菊花被用作药物并具有清热解毒的作用,因此选择了其渣作为该实验的阴性对照。同时,将双黄连和银翘粉的处方添加到金银花和金银花的单一药物中。忍冬,并选择其中的水提取物参与实验。为了验证金银花和忍冬的印记等效性,探索主体分子对客体分子的选择性吸附,制备金银花,忍冬,菊花渣和金银花,忍冬,双黄连(忍冬属银花水提物)选择性地吸附银杏散(金银花)和银翘三(金银花),然后用hplc测定其吸附前后的水提取物指纹图谱。统计矩的原理是一种非隔室模型分析方法,可以通过总零阶矩(auc),总一阶矩(mrt)和总第二阶矩来分析中药及其复方的指纹。订单时刻(vrt)。零阶矩表示血药浓度-时间曲线下的面积,即整个指纹峰面积的总和,一阶矩是平均停留时间,即中心位置整个指纹中所有峰的重力,二阶矩是平均停留时间。方差是指纹谱中每个峰与峰重心之间的距离。与其他指纹分析方法相比,该方法具有抗干扰,可加和耦合的特点[30-32]。长期以来,我们的团队一直致力于将总统计矩方法应用于中药及其复方制剂的指纹分析,并取得了良好的效果。何福源等。="" [33]使用高效液相色谱法测定不同来源大黄的指纹图谱,并用总统计矩法对其进行分析,发现大黄可以通过一阶矩定性鉴定,胡超等。="" [34]通过总统计矩法对不同批次的仔仔ien指纹图谱进行分析,所建立的仔仔huang指纹图谱具有良好的重复性,准确性和强性。另外,杨延涛等。="" [35],周进等。="" [36-37],谢祥贵等。="" [38]也对此进行了研究,并证实该方法可以对中药及其复方的指纹图谱进行定性和定量分析。更好。在该实验中,通过计算实验后所有指纹的第一时刻,原始客体分子与相应客体分子被不同宿主分子吸附后的指纹之间的差异,比较同一客体分子的指纹变化被不同的宿主分子吸附后。目的探讨三个宿主分子是否具有相同的印迹模板,以评价金银花和忍冬的印迹模板的等效性。="" 2试剂和仪器2.1试剂和试剂金银花金银花(金银花的干燥花蕾或初开花),chrysanthemiflos(菊花的干燥头,菊花,金银花,干黄连)。黄cut的根,连翘(连翘的干果(thunb。vahl)),银翘散方药(金银花,连翘,薄荷,haplocalycisherba(薄荷叶的干气生部分),裂缘子,裂殖体。="" sojae="" semenpraemaxparatum(大豆)发酵的成熟产品是merr。),arctiifructus(牛ry的成熟果实),platycodonis="" radix(桔梗)。草的干燥根),lophatheriherba(lophatherumgracilebrongn的干茎和叶)。上述药品和中药处方均委托湖南中医药大学附属医院药房购买。金银花(loniceramacranthoides="" hand.-mazz。的干花芽)购自湖南省隆回县。="" ,并被湖南大学药学院中药鉴定学系史继联副教授鉴定根据《中国药典》="" 2015年版的有关规定,该方法具有真实性。乙腈色谱纯净,水是自制的超纯水。="" 2.2仪器waters1525binaryhplc泵,waters2489uv="" visibledetector,breeze工作站,美国waters,re-200b旋转蒸发仪,巩义市雨花仪器有限公司,shb-iiias循环水真空泵,zdhw恒温电加热套,北京中兴伟业仪器有限公司。="" ,yp-b10001电子天平,上海广正医疗器械有限公司,dfy-400摆动式高速中药粉碎机,温岭林达机械有限公司,dzf-6050真空干燥箱,上海景宏实验所设备有限公司,sk3300h超声波清洗机,上海科迅超声仪器有限公司,ts-a脱色摇床,金坛中大仪器厂,移液枪,雪北医疗设备有限公司。3方法3.1色谱条件色谱柱为ultimateaq-c18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为0.4%磷酸水溶液-乙腈,梯度洗脱:0〜5min,5%〜8%乙腈,5〜25min,8%〜乙腈20%,25〜35m="" in,20%〜22%乙腈,35〜45min,22%〜30%乙腈,45〜50min,30%〜36%乙腈,体积流量1.0ml="" min,样品体积10μl,检测波长238nm,柱温是30℃。各组成理论塔="">